Heterogenita imunoanalýzy a dôsledky pre sérosledovanie SARS-CoV-2

Sérosurveillance sa zaoberá odhadom prevalencie protilátok v populácii proti konkrétnemu patogénu.Pomáha merať imunitu populácie po infekcii alebo očkovaní a má epidemiologické využitie pri meraní rizík prenosu a úrovne imunity populácie.V súčasnej pandémii koronavírusového ochorenia 2019 (COVID-19) zohral sérologický prieskum kľúčovú úlohu pri hodnotení skutočného stupňa infekcie koronavírusom 2 (SARS-CoV-2) závažného akútneho respiračného syndrómu v rôznych populáciách.Pomohla tiež stanoviť epidemiologické ukazovatele, napr. pomer úmrtnosti pri infekciách (IFR).

Do konca roka 2020 bolo zverejnených 400 sérologických prieskumov.Tieto štúdie boli založené na rôznych typoch imunotestov, ktoré boli navrhnuté tak, aby analyzovali protilátky proti SARS-CoV-2, primárne zamerané na všetky alebo časť vrcholových (S) a nukleokapsidových (N) proteínov SARS-CoV-2.V súčasnom scenári pandémie COVID-19 sa v rôznych regiónoch sveta vyskytujú po sebe nasledujúce vlny epidémie, ktoré v danom čase infikujú rôznorodú zmes populácie.Tento jav spochybnil sérosledovanie SARS-CoV-2 z dôvodu čoraz heterogénnejšej imunologické krajiny.

Vedci zistili, že hladiny protilátok proti SARS-CoV-2 majú po období rekonvalescencie tendenciu klesať.Takýto výskyt zvyšuje šance na negatívne výsledky imunotestov.Tieto falošné negatívne výsledky môžu riadne podkopať závažnosť skutočnej miery infekcie, pokiaľ nie sú rýchlo rozpoznané a napravené.Okrem toho sa kinetika protilátok po infekcii javí odlišne v závislosti od závažnosti infekcie – závažnejšia infekcia COVID-19 má tendenciu viesť k väčšiemu zvýšeniu hladiny protilátok v porovnaní s miernymi alebo asymptomatickými infekciami.

Niekoľko štúdií charakterizovalo kinetiku protilátok počas šiestich mesiacov po infekcii.Tieto štúdie zistili, že väčšina jedincov v komunitách infikovaných SARS-CoV-2 vykazovala mierne alebo asymptomatické infekcie.Výskumníci sa domnievajú, že je nevyhnutné kvantifikovať zmenu hladín protilátok pomocou dostupných imunotestov v širokom spektre závažnosti infekcie.Vek bol tiež považovaný za dôležitý faktor v týchto štúdiách.

V nedávnej štúdii vedci kvantifikovali hladiny protilátok proti SARS-CoV-2 až 9 mesiacov po infekcii a svoje zistenia zverejnili vmedRxiv* predtlačový server.V súčasnej štúdii bola skupina séropozitívnych jedincov získaná prostredníctvom sérologických prieskumov uskutočnených v Ženeve vo Švajčiarsku.Výskumníci použili tri rôzne imunotesty, a to semikvantitatívne anti-S1 ELISA detegujúce IgG (označované ako EI), kvantitatívne Elecsys anti-RBD (označované ako Roche-S) a semikvantitatívne Elecsys anti-N (označované ako Roche- N).Súčasný výskum poskytuje dôležitý pohľad na populačné sérologické štúdie a ukazuje zložitosť imunitného prostredia v dôsledku zmesi nedávnych a distálnych infekcií COVID-19, ako aj očkovania.

Uvažovaná štúdia uvádza, že jedinci, ktorí sa nakazili COVID-19 s miernymi príznakmi alebo boli asymptomatickí, odhalili prítomnosť protilátok.Tieto protilátky sa zamerali buď na nukleokapsidové (N) alebo hrotové (S) proteíny SARS-CoV-2 a zistilo sa, že pretrvávajú najmenej 8 mesiacov po infekcii.Ich detekcia však veľmi závisí od výberu imunoanalýzy.Výskumníci zistili, že počiatočné merania protilátok, odobraté od účastníkov do štyroch a pol mesiaca od COVID-19, boli konzistentné vo všetkých troch typoch imunotestov použitých v tejto štúdii.Avšak po prvých štyroch mesiacoch a až ôsmich mesiacoch po infekcii sa výsledky v rámci testov rozchádzali.

Tento výskum odhalil, že v prípade testu EI IgG u jedného zo štyroch účastníkov došlo k séroreverzii.Avšak pri iných imunotestoch, ako sú Roche anti-N a anti-RBD testy celkového Ig, sa pre rovnakú vzorku detegovalo len niekoľko alebo žiadne séro-reverzie.Dokonca aj účastníci s miernymi infekciami, o ktorých sa predtým predpokladalo, že vyvolávajú menej silné imunitné reakcie, preukázali citlivosť pri použití testov anti-RBD a anti-N celkového Ig Roche.Oba testy zostali citlivé viac ako 8 mesiacov po infekcii.Tieto výsledky teda odhalili, že oba Rocheove imunotesty sú vhodnejšie na odhad séroprevalencie po dlhom čase po počiatočnej infekcii.

Následne pomocou simulačných analýz výskumníci dospeli k záveru, že bez presnej metódy kvantifikácie, najmä vzhľadom na časovo sa meniacu citlivosť testu, by prieskumy séroprevalencie neboli presné.To by viedlo k podhodnoteniu skutočného počtu kumulatívnych infekcií v populácii.Táto imunoanalytická štúdia ukázala existenciu rozdielov v miere séropozitivity medzi komerčne dostupnými testami.

Je potrebné poznamenať, že táto štúdia má niekoľko obmedzení.Napríklad činidlo použité pri vykonávaní testu EI pre základné (počiatočný alebo prvý test) a následné (2. test pre rovnakých kandidátov) vzorky v rámci špecifického časového intervalu bolo odlišné.Ďalším obmedzením tejto štúdie je, že kohorty nezahŕňali deti.Doteraz nebol zdokumentovaný žiadny dôkaz o dlhodobej dynamike protilátok u detí.


Čas odoslania: 24. marca 2021